河南科技大學動物科技學院   李 旺  王占彬  武曉紅

摘要：綜述了飼料粗脂肪分析測定的常用方法，結合筆者自身工作經驗，闡述了飼料粗脂肪分析測定常用方法各自的優(yōu)缺點。

關鍵詞：粗脂肪  分析測定

粗脂肪是飼料中的重要營養(yǎng)素，飼料中的粗脂肪含量是評價飼料質量的標準之一。飼料脂肪的測定，通常是將試樣放在特定的儀器中，用脂溶性溶劑(乙醚、氯仿、石油醚等)反復浸提試樣、稱量提取物的重量，因在提取物中除脂肪外，還有有機酸、磷脂、脂溶性維生素、葉綠素等，所以提取物稱為粗脂肪或乙醚提取物。測定粗脂肪的方法很多，本文就目前應用較多的幾種方法進行分析，比較其各自的優(yōu)缺點，以為讀者選擇恰當測定方法提供一點幫助。

基本原理：根據飼料中的油脂均可溶解于乙醚中，故用無水乙醚反復浸提飼料中的脂肪，使脂肪全部溶解于乙醚中，然后將乙醚蒸發(fā)，瓶中所剩殘渣的重量即為飼料的粗脂肪含量。

1 油重法(或抽提瓶增重法)

1.1 原理

試樣在抽提管中反復抽提，直到脂肪抽提干凈，抽提瓶的增重即為樣品所含粗脂肪重量。

1.2 材料方法

索氏脂肪提取器、分析天平、電熱恒溫鼓風干燥箱、水浴鍋、乙醚等。

索氏提取器應干燥無水：抽提瓶在105±2℃ 烘箱中烘干60min，干燥器中冷卻30min，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次質量之差小于0.0008g 為恒重。

稱取試樣1～5g (準確至0.0002g)，置于濾紙筒中或用濾紙包好，濾紙包應低于提取器虹吸管的中或用濾紙包好，濾紙包應低于提取器虹吸管的高度，并應全部浸泡于乙醚中，將濾紙包放入抽提管，在抽提瓶中加無水乙醚，在60～75℃ 的水浴加熱，70 次為抽提終點 [或以抽提管流出的乙醚揮發(fā)后不留下油跡為抽提終點]。

取出試樣，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶內的乙醚被全部收完，取下抽提瓶，在水浴鍋上蒸除殘留乙醚。擦凈外壁，將抽提瓶放人105±2℃ 烘箱中烘干120min，燥器中冷卻 30min，稱重，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次質量差小于0.001g 為恒重，抽提瓶前后重量之差為粗脂肪含量

1.3 優(yōu)點

1.3.1 樣品含有的粗脂肪，完全被抽提瓶回收，可以進一步分析樣品脂肪酸組成，及脂肪酸品質。

1.3.2 整個過程在樣品絕干狀態(tài)下進行，實驗結果產生誤差的機會小。

1.4 缺點

1.4.1 長時間烘干，抽提瓶會在恒重之后又增重，主要原因是粗脂肪有可能在抽提瓶發(fā)生氧化反應而使重量增加，粗脂肪品質發(fā)生變化。

1.4.2 抽提瓶重量、體積均較大，在分析天平上稱量時有一定的困難。

1.4.3 實驗一次想進行多個樣品，或做多組重復時，需要的提取器相應增多，不利于同時進行，在實驗性教學上不方便。

1.4.4 時間長，危險大，整個實驗完成大概要8h 左右。乙醚有毒，易揮發(fā)，大量吸入頭暈、眼酸、腹瀉。有些情況下還可能燃燒。

2 殘余法(或濾紙包減重法)

2.1 原理

試樣在抽提管中反復抽提，直到脂肪抽提干凈，濾紙包的減重即為樣品所含粗脂肪重量。

2.2 材料方法

同上法前半部分取出試樣，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶內的乙醚被全部收完，將樣品包放入105±2℃ 烘箱中烘干120min，燥器中冷卻30min，稱重，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次質量差小于0.001g 為恒重，濾紙包前后重量之差為樣品粗脂肪含量。

2.3 優(yōu)點

2.3.1 一個抽提管可以盛多個樣品包(只需在樣包上用鉛筆做出標記即可)，有利于同時進行多個樣品，或進行多組重復。適合教學實驗用。

2.3.2 濾紙包中的樣品經過脫脂處理，可以進行其他相關養(yǎng)分的分析測定，省去再脫脂的步驟。

2.4 缺點

2.4.1 濾紙包在稱量過程中，由于是絕干狀態(tài)，很容易吸潮，在分析天平上很難平衡。對實驗結果造成影響。

    2.4.2 實驗不能進一步分析樣品中粗脂肪的品質及組成，因為不能清楚粗脂肪來源于哪個樣包，哪種樣品。

    2.4.3 同1.4.4。

3 濾袋技術測粗脂肪

濾袋技術(filter bag technology,FBT)于批量分析飼料中的纖維含量的推廣，使ANKOM Technology 在1993 年準確測定酸性洗維(Neutral Detergent Fiber,XDF)和粗纖維(Crude-Fiber,CF)。基于在纖維分析方面已獲得的經驗，ANKOM Technology 新近又開發(fā)了一項快速批抽提脂肪技術(Accelerated Batch Extraction,ABE)、ANKOM XT20 脂肪分析儀是采用ANKOM 技術開發(fā)的一項使用普通溶劑快速抽提食品和飼料脂肪的新技術而研制成的。

3.1 原理

ABE 的原理十分簡單。樣品被分裝在一種用特殊材料制作的濾袋中，在溶劑的作用下，脂肪溶解透出濾袋，而樣品基質顆粒不能通過濾袋而留在濾袋中.從而實現脂肪與樣品基質的分離。

3.2 材料方法

ANKOM X120 脂肪分析儀、XT20 濾袋、石油醚、封口機稱取1～3g 代表性樣品于已知重量的XT20 濾袋中，封口。將盛有樣品的濾袋擺放在XT20 樣品架上。將XT20 樣品架放入分析儀的抽提缸中。按 LID 按扭關閉抽提缸蓋。從操作控制臺(Operator Control Station,OCS)上選擇程序方式，按“Auto Start”自動開始。一旦一個程序或者手動輸入設定被選中，儀器會開始所有的所需步驟。當抽提過程完成后，XT20-OCS 將顯示“Test Complete-Remove Sample.”(測試結束，移去樣品)。將濾袋置于100℃ 條件下干燥1h，并稱重。濾袋前后重量之差即為樣品粗脂肪含量。

3.3 優(yōu)點

3.3.1 高效，一次能用不同的方式完成20 個樣品的抽提，多數情況下，30～50min 內完成抽提，適合要求準確、精密和快速的測定粗脂肪的實驗室采用。

3.3.2 安全，使石油醚代替乙醚，沸點升高，每個操作環(huán)節(jié)都有安全保證裝置，不易發(fā)生爆炸、燃燒。

3.4 缺點

該套儀器設備，目前價格昂貴，國內只有少數科研院所有，不易在大規(guī)模的飼料分析實驗中采用。

4 脂肪測定儀測

4.1原理

仍然是經典的索氏提取法，但又將浸提過程分為高溫沸騰浸提和沖洗兩個步驟，浸提時間大為縮短。

4.2材料方法

ZF2001 型脂肪測定儀(配濾紙簡)，分析天平，烘箱，無水乙醚。

根據樣品的脂肪含量，準確稱取過40 目篩的樣品2～5g，放入濾紙筒內，烘干樣品，把濾紙筒放到脂肪測定儀中。樣品提取杯中加人50mL 無水乙醚，放到儀器的加熱板上。壓下連接手柄，使提取杯與回流器密封連接，接通冷凝水。將濾紙筒通過滑桿放人提取杯中，打開電源，5min 內乙醚沸騰，樣品進行高溫浸提，提取1h 后，拉動滑桿，將濾紙筒從提取杯中提升出來，用回流冷凝的乙醚淋洗樣品殘余的脂肪30min，關閉淋洗閥門，開始回收乙醚，約5min 乙醚回收完畢，取下提取杯，在105℃ 烘干至恒重，提取杯增重即為粗脂肪的含量。

4.3優(yōu)點

4.3.1脂肪測定儀測定的不同樣品所取得的結果來看，其精密度、準確度都很好，說明用脂肪測定儀測定的結果準確可靠。

4.3.2用脂肪測定儀測定的速度快，當天可完成整個測定過程，取得測定結果，并且可同時測定6 個試樣。與經典方法比較大大提高了效率、簡化了操作、降低了成本、節(jié)省了能源，能較好地滿足日常生產和商貿交易工作中對脂肪含量測定的需要。