1 范圍

本方法規(guī)定了飼料中飼料中中性洗滌纖維(NDF) 的測定方法。

本方法適用于各種單一飼料和配合飼料。

本方法不適用于無機鹽類飼料添加劑。

2 原理

飼料如一般飼料、牧草和粗纖維在一定溫度下，經(jīng)中性洗滌劑處理，可洗滌分解大部分細胞內(nèi)容物，如脂肪、淀粉、蛋白質(zhì)和糖類等，不溶解的殘渣為中性洗滌纖維（NDF），包括構(gòu)成細胞壁的半纖維素、纖維素、木質(zhì)素和少量硅酸鹽等雜質(zhì)。

3 儀器和設(shè)備

3.1 消化裝置- Ringbio 纖維分析儀。

3.2 濾袋- Ringbio 專用濾袋。

3.3 封口機。

3.4 電熱干燥箱。

3.5 高溫電阻爐。

3.6 耐溶劑記號筆。

3.7 干燥器：無水氯化鈣或變色硅膠為干燥劑。

3.8 分析天平- 精確至0.1 mg。

4 試劑和溶液

4.1 十二烷基硫酸鈉。

4.2 乙二胺四乙酸二鈉（EDTA 二鈉鹽）。

4.3 四硼酸鈉（Na₂B₄O₇·10H₂O）。

4.4 無水磷酸氫二鈉。

4.5 三甘醇。

4.6 正辛醇（消泡劑）。

4.7 丙酮。

4.8 α-高溫淀粉酶。

4.9 中性洗滌劑（3％十二烷基硫酸鈉溶液）：稱取60.0 g 十二烷基硫酸鈉（USP）；37.22 g 乙二胺四乙酸二鈉（Na₂EDTA）；13.62 g 四硼酸鈉（Na₂B4O₇）十水；9.12 g 無水磷酸氫二鈉（Na₂HPO₄）；20.0 ml 三甘醇；全部溶解在2 L 水中，適當(dāng)?shù)臄嚢韬图訜嵊兄谌芙狻z查適當(dāng)?shù)?/span>pH 在6.9～7.1。

5 測定步驟

5.1 試樣

用耐溶劑記號筆給濾袋編號，稱重記為m₁。準確稱取0.5 (± 0.05) g 制備好的樣品于濾袋中，記為m。樣品需要粉碎過1mm 篩。在距離濾袋上邊緣約4mm 處用封口機封口，將樣品在濾袋中展平，均勻分布。

至少取一個空濾袋作為空白，記為C，做空白測定。

5.2 預(yù)先脫脂

脂肪含量高的樣品需要脫脂。將裝有樣品的濾袋放入玻璃容器中，加丙酮使濾袋完全浸沒，浸泡10min，倒掉溶劑，將濾袋放在網(wǎng)篩上涼干。

5.3 放置濾袋

將樣品袋放在托盤上，每層托盤可放三個。一次最多可以在濾袋架上放24個濾袋。無論放置濾袋數(shù)量多少，8 層濾袋架上的托盤要全部使用，層與層之間錯開120°。然后將裝有濾袋的支架放入纖維分析儀消煮器中，將金屬壓錘放在支架頂部，以確保消煮過程中不浮起。

5.4 消煮

當(dāng)處理24 個樣品袋時，在消煮缸體內(nèi)加入1900～2000 mL 已配好的中性洗滌劑溶液。如果處理的樣品袋少于20 個，按照每個濾袋加100 mL 溶液，但不能少于1500 mL，要確保濾袋托盤能完全浸沒。再向消煮缸體內(nèi)加入20.0 g 無水亞硫酸鈉和4.0 g α-高溫淀粉酶。按下HEAT+AGITATE按鍵，設(shè)置處理時間75 min，確保濾袋支架攪拌正常。蓋上蓋子并完全密封好。儀器將加熱并維持溶液溫度100 °C。

5.5 排廢

時間到后加熱攪拌自動關(guān)停，消煮結(jié)束，按下EXHAUST按鍵，排出廢液。

*注：消煮器中的溶液是有壓力的，在打開蓋子之前一定將廢液全部排盡以釋放壓力。

5.6 水洗

溶液排盡后，打開蓋子，加2L (70°C~90°C) 的蒸餾水，并且第1次和第2次淋洗時同時加4.0 g α-高溫淀粉酶，放下蓋子，但不旋緊。按下FLUSH 按鍵，設(shè)置時間為5 min。重復(fù)2 次，共淋洗3 次。最后一次淋洗后，加冷的自來水以操作和使冷卻容器，為下輪測定做好準備。

5.7 浸泡丙酮

將濾袋從濾袋支架上取下來，輕輕擠壓去掉多余的水。然后將濾袋放入250 mL 燒杯中，加丙酮至浸沒濾袋，浸泡3~5 min 后，取出并輕輕擠壓去掉多余的丙酮。

5.8 烘干并稱重

在通風(fēng)櫥中展開濾袋，讓其自然干燥。完全干燥后放入102 °C±2 °C 烘箱中烘干2～4 h。

*注：為避免濾袋燃燒，在丙酮完全揮發(fā)前不能把濾袋放入烘箱中。

從烘箱中取出濾袋，直接放入干燥器中冷卻至室溫，稱重記為m₂。

6 結(jié)果計算

試樣中中性洗滌纖維質(zhì)量分數(shù)按以下公式計算：

其中：

m₁——空濾袋質(zhì)量，g；

m——樣品質(zhì)量，g；

m₂——提取處理后樣品殘渣質(zhì)量+濾袋質(zhì)量，g；

C——為空白濾袋校正系數(shù)(烘干后質(zhì)量/原來質(zhì)量)。

7 安全注意 

7.1 丙酮易燃，操作時應(yīng)在通風(fēng)櫥中進行，避免吸入或與皮膚接觸。將濾袋放入烘箱之前，要確保濾袋完全干燥，丙酮完全揮發(fā)。

7.2 十二烷基硫酸鈉對黏膜有刺激，因此操作時要帶防塵口罩和手套。