1.1 本方法規(guī)定了飼料中飼料中酸性洗滌纖維(ADF) 的測(cè)定方法。
1.2 本標(biāo)準(zhǔn)適用于各種植物性單一飼料。
2 原理
植物性經(jīng)酸性洗滌劑浸煮,再用水、丙酮洗滌后不溶解的殘?jiān)鼮樗嵝韵礈炖w維,包括纖維素、木質(zhì)素和少量硅酸鹽等。
3 儀器和設(shè)備
3.1 消化裝置- Ringbio纖維分析儀。
3.2 濾袋- Ringbio專用濾袋。
3.3 封口機(jī)。
3.4 電熱干燥箱。
3.5 高溫電阻爐。
3.6 耐溶劑記號(hào)筆。
3.7 干燥器:無(wú)水氯化鈣或變色硅膠為干燥劑。
3.8 分析天平- 精確至0.1 mg。
4 試劑和溶液
4.1 硫酸。
4.2 丙酮。
4.3 十六烷基三甲基溴化銨。
4.4 1.00mol/L 硫酸(1/2 H2SO4)溶液:按GB/T 601配制并標(biāo)定。
4.5 酸性洗滌劑(2%十六烷基三甲基溴化銨溶液):稱取20g CTAB溶解于1000mL 1.0 mol/L硫酸溶液中,攪拌溶解。
5 測(cè)定步驟
5.1 試樣
用耐溶劑記號(hào)筆給濾袋編號(hào),稱重記為m1。準(zhǔn)確稱取0.5 (± 0.05) g 制備好的樣品于濾袋中,記為m。樣品需要粉碎過(guò)1 mm篩。在距離濾袋上邊緣約4 mm處用封口機(jī)封口,將樣品在濾袋中展平,均勻分布。
至少取一個(gè)空濾袋作為空白,記為C,做空白測(cè)定。
5.2 預(yù)先脫脂
脂肪含量高的樣品需要脫脂。將裝有樣品的濾袋放入玻璃容器中,加丙酮使濾袋完全浸沒,浸泡10 min,倒掉溶劑,將濾袋放在網(wǎng)篩上涼干。
5.3 放置濾袋
將樣品袋放在托盤上,每層托盤可放三個(gè)。一次最多可以在濾袋架上放24個(gè)濾袋。無(wú)論放置濾袋數(shù)量多少,8 層濾袋架上的托盤要全部使用,層與層之間錯(cuò)開120°。然后將裝有濾袋的支架放入纖維分析儀消煮器中,將金屬壓錘放在支架頂部,以確保消煮過(guò)程中不浮起。
5.4 消煮
當(dāng)處理24 個(gè)樣品袋時(shí),在消煮缸體內(nèi)加入1900- 2000 mL 已配好的酸性洗滌劑溶液。如果處理的樣品袋少于20 個(gè),按照每個(gè)濾袋加100 mL 溶液,但不能少于1500 mL ,要確保濾袋托盤能完全浸沒。按下HEAT+AGITATE按鍵,設(shè)置處理時(shí)間60min,確保濾袋支架攪拌正常。蓋上蓋子并完全密封好。儀器將加熱并維持溶液溫度100°C。
5.5 排廢
時(shí)間到后加熱攪拌自動(dòng)關(guān)停,消煮結(jié)束,按下EXHAUST 按鍵,排出廢液。
*注:消煮器中的溶液是有壓力的,在打開蓋子之前一定將廢液全部排盡以釋放壓力。
5.6 水洗
溶液排盡后,打開蓋子,加2L (70°C~90°C) 蒸餾水,放下蓋子,但不旋緊。按下FLUSH 按鍵,設(shè)置時(shí)間為5 min。重復(fù)2 次,共淋洗3 次或洗滌至中性。。
5.7 浸泡丙酮
將濾袋從濾袋支架上取下來(lái),輕輕擠壓去掉多余的水。然后將濾袋放入250 mL 燒杯中,加丙酮至浸沒濾袋,浸泡3~5 min后,取出并輕輕擠壓去掉多余的丙酮。
5.8 烘干并稱重
在通風(fēng)櫥中展開濾袋,讓其自然干燥。完全干燥后放入102°C±2°C 烘箱中烘干2~4 h。
*注:為避免濾袋燃燒,在丙酮完全揮發(fā)前不能把濾袋放入烘箱中。
從烘箱中取出濾袋,直接放入干燥器中冷卻至室溫,稱重記為m2。
6 結(jié)果計(jì)算
試樣中中性洗滌纖維質(zhì)量分?jǐn)?shù)按以下公式計(jì)算:
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其中:
m——樣品質(zhì)量,g;
m2——提取處理后樣品殘?jiān)|(zhì)量+濾袋質(zhì)量,g;
C——為空白濾袋校正系數(shù)(烘干后質(zhì)量/原來(lái)質(zhì)量)。
7 安全注意
7.1 丙酮易燃,操作時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,避免吸入或與皮膚接觸。將濾袋放入烘箱之前,要確保濾袋完全干燥,丙酮完全揮發(fā)。
7.2 十六烷基三甲基溴化銨對(duì)黏膜有刺激,因此操作時(shí)要帶防塵口罩和手套。